【琼脂糖凝胶电泳是干什么的】琼脂糖凝胶电泳是一种在分子生物学和生物化学中广泛应用的技术，主要用于分离和分析DNA、RNA等核酸分子。通过电场的作用，带负电的核酸分子会向正极移动，根据其大小和形状的不同，在凝胶中迁移的速度也不同，从而实现分离。
以下是关于琼脂糖凝胶电泳的简要总结：
一、琼脂糖凝胶电泳的主要用途
| 用途 | 说明 |
| DNA/RNA 分离 | 根据分子大小分离核酸片段 |
| 质量检测 | 检测提取的DNA或RNA是否完整、有无降解 |
| 定量分析 | 通过与已知浓度的标准品比较，估算样品含量 |
| 验证PCR产物 | 确认PCR扩增结果是否正确 |
| 分子量测定 | 通过标记物（Marker）判断目标片段大小 |
二、实验原理
琼脂糖凝胶是由琼脂糖粉末溶解后冷却形成的多孔网状结构。当电流通过时，带负电的核酸分子会向正极移动。由于凝胶的孔径大小不同，小分子比大分子更容易通过，因此可以按大小进行分离。
三、操作步骤简述
1. 制备凝胶：将琼脂糖粉末溶于缓冲液中，加热后倒入模具冷却成凝胶。
2. 加样：在凝胶孔中加入待测样品和分子量标准物（Marker）。
3. 通电：接通电源，使核酸分子在凝胶中迁移。
4. 染色与观察：使用染料（如溴化乙锭）对凝胶进行染色，紫外灯下观察条带。
四、优点与局限性
| 优点 | 局限性 |
| 操作简单，成本低 | 分辨率有限，不适合超大分子 |
| 适用于常规检测 | 无法区分相同大小但不同序列的核酸 |
| 可同时检测多个样品 | 染色剂可能对人体有害 |
五、应用场景举例
- 基因克隆中的片段筛选
- PCR产物验证
- 基因组DNA完整性分析
- RNA纯度检测
- 用于法医学中的DNA指纹分析
通过琼脂糖凝胶电泳，研究人员可以快速、直观地了解核酸样品的基本信息，是分子生物学实验室中不可或缺的基础技术之一。
